25 Şubat 1964 gecesi Miami'de, dönemin dört önemli ismi aynı odada buluşur: boks dünyasının yükselen yıldızı Cassius Clay, Amerikan futbolunun başarılı oyuncusu Jim Brown, ünlü müzisyen Sam Cooke ve etkili aktivist Malcolm X. Clay'in dünya ağır sıklet şampiyonluğunu kazanmasının ardından gerçekleşen bu buluşma, sıradan bir kutlamadan çok daha fazlasına dönüşür.
Gece ilerledikçe dört arkadaş başarı, şöhret, sorumluluk ve Amerika'daki ırkçılık üzerine düşüncelerini açıkça paylaşmaya başlar. Her biri toplumdaki değişime nasıl katkıda bulunması gerektiğine dair farklı fikirlere sahiptir. Özellikle Malcolm X'in düşünceleri, diğerlerini sahip oldukları konumu ve etkilerini nasıl kullandıkları konusunda kendilerini sorgulamaya iter.
Gerçek kişilerden ve dönemin tarihsel atmosferinden esinlenen Miami'de Bir Gece - One Night in Miami, dört önemli ismin hayali buluşması üzerinden dostluk, kimlik, özgürlük ve toplumsal sorumluluk üzerine güçlü bir hikâye anlatıyor.